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在定量(liang)分析方法中(zhong)，由于(yu)很多物質在紫外光-可見(jian)光區有吸(xi)收，可以借助比色(se)法進行(xing)測定，因此(ci)光度(du)分析法廣泛(fan)的(de)應用于(yu)地質、冶金(jin)、化工、醫學、食(shi)品、制藥及環(huan)境(jing)監測等(deng)行(xing)業(ye)。在光度(du)分析法中(zhong)，比色(se)皿的(de)選擇(ze)、使用及維(wei)護對分析結果有著重要(yao)的(de)影(ying)響，下面我們就從這些角度(du)來聊聊比色(se)皿。

一、比色皿的分類

比(bi)(bi)色(se)皿(min)的制造工藝有兩種，一種是粘合(he)劑粘合(he)而(er)成(cheng)，另(ling)一種是高溫(wen)熔融而(er)成(cheng)。比(bi)(bi)色(se)皿(min)的材料(liao)通常來源于石英、熔凝硅石和光(guang)(guang)學玻璃(li)。玻璃(li)比(bi)(bi)色(se)皿(min)對紫外線幾(ji)乎全(quan)部吸收(shou)，吸光(guang)(guang)度(du)非常大。而(er)石英比(bi)(bi)色(se)皿(min)的吸光(guang)(guang)度(du)則(ze)小得多。常用比(bi)(bi)色(se)的形(xing)(xing)狀(zhuang)有方形(xing)(xing)、矩形(xing)(xing)和圓筒形(xing)(xing)，容量一般為(wei)幾(ji)毫升，也(ye)有用于少量試(shi)樣(yang)的微型或超微型毛細管皿(min)。另(ling)外還有高、低溫(wen)恒比(bi)(bi)色(se)皿(min)。

二、比色血的選擇

分(fen)(fen)析(xi)(xi)波(bo)長在350nm以(yi)上時可(ke)選(xuan)用玻璃或石(shi)英比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)，在350nm以(yi)下時須使(shi)(shi)用石(shi)英比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)。比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)皿(min)有不同(tong)的(de)(de)(de)光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)，一常用的(de)(de)(de)有0.5、1、2、3、125px，選(xuan)擇哪種光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)的(de)(de)(de)比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)應視分(fen)(fen)析(xi)(xi)樣品的(de)(de)(de)吸光(guang)(guang)度(du)而定。當(dang)比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)液的(de)(de)(de)顏(yan)色(se)(se)(se)(se)(se)較(jiao)(jiao)淡時，應選(xuan)用光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)較(jiao)(jiao)大的(de)(de)(de)如(ru)(ru)50px、75px比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)皿(min)；當(dang)比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)液的(de)(de)(de)顏(yan)色(se)(se)(se)(se)(se)較(jiao)(jiao)深時，應選(xuan)用光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)較(jiao)(jiao)小的(de)(de)(de)如(ru)(ru)12.5px、25px比(bi)色(se)(se)(se)(se)(se)皿(min)，以(yi)使(shi)(shi)所測溶液的(de)(de)(de)吸光(guang)(guang)度(du)在0.1~0.7之(zhi)間。

三、比色皿的校正

比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)有方(fang)向(xiang)性。有些比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)上標有方(fang)向(xiang)標記(ji)(ji)，使用(yong)時必須注意。無方(fang)向(xiang)標記(ji)(ji)的比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)應予以(yi)校正(zheng)。校正(zheng)時要先確定(ding)(ding)方(fang)向(xiang)并作(zuo)好標記(ji)(ji)以(yi)減少測定(ding)(ding)誤差(cha)。比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)的校正(zheng)方(fang)法是：將(jiang)(jiang)純(chun)凈的蒸館水注入比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)中，把其中吸(xi)收(shou)最小(xiao)(xiao)的比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)的吸(xi)光(guang)(guang)度置(zhi)為零(ling)，并以(yi)此為基準，測出其它比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)的相對吸(xi)光(guang)(guang)度。測定(ding)(ding)比(bi)(bi)色(se)(se)液(ye)時，應將(jiang)(jiang)其吸(xi)光(guang)(guang)度減去比(bi)(bi)色(se)(se)皿(min)(min)(min)的吸(xi)光(guang)(guang)度。同一(yi)組比(bi)(bi)色(se)(se)相互(hu)間的差(cha)異應小(xiao)(xiao)于測定(ding)(ding)誤差(cha)。在測定(ding)(ding)同一(yi)溶液(ye)時，吸(xi)光(guang)(guang)度差(cha)值(zhi)應小(xiao)(xiao)于0.5%，否則應對差(cha)值(zhi)進行(xing)校正(zheng)。

比(bi)色(se)皿(min)的(de)光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)(du)也(ye)需校(xiao)正(zheng)(zheng)，校(xiao)正(zheng)(zheng)時(shi)可將(jiang)吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)約為(wei)(wei)0.4的(de)溶液分別注入校(xiao)正(zheng)(zheng)皿(min)和具有準(zhun)(zhun)確光(guang)(guang)程(cheng)長度(du)(du)的(de)標準(zhun)(zhun)比(bi)色(se)皿(min)中，測(ce)定吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)。以標準(zhun)(zhun)比(bi)色(se)的(de)吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)為(wei)(wei)1.00，求出(chu)校(xiao)正(zheng)(zheng)比(bi)色(se)皿(min)吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)的(de)相對(dui)值(zhi)作為(wei)(wei)該(gai)比(bi)色(se)皿(min)的(de)校(xiao)正(zheng)(zheng)系數(shu)。測(ce)定比(bi)色(se)液時(shi)，可將(jiang)所測(ce)得的(de)吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)乘以該(gai)皿(min)的(de)校(xiao)正(zheng)(zheng)系數(shu)以得到實際吸(xi)光(guang)(guang)度(du)(du)值(zhi)。

四、比(bi)色皿的使用與(yu)維護(hu)

拿取(qu)比(bi)色(se)(se)皿(min)時不得接觸透光(guang)面，否(fou)則(ze)指紋、油污會弄臟(zang)窗口而使(shi)比(bi)色(se)(se)皿(min)改變透光(guang)性能(neng)。使(shi)用(yong)比(bi)色(se)(se)皿(min)時應于測試前將待(dai)測液倒入比(bi)色(se)(se)皿(min)洗(xi)滌三次(注意不要產生氣泡)。比(bi)色(se)(se)外的(de)水和溶液可先(xian)用(yong)濾紙吸干(gan)，再(zai)用(yong)鏡頭紙或(huo)軟綢(chou)布擦拭(shi)，不能(neng)在(zai)電爐或(huo)火焰上加熱干(gan)燥。比(bi)色(se)(se)皿(min)在(zai)光(guang)路(lu)中應垂(chui)直于光(guang)束(shu)方向，以減少(shao)反射損失。

每次使(shi)用(yong)完(wan)畢的(de)比(bi)色(se)皿，一般先(xian)用(yong)自來(lai)水(shui)沖洗(xi)再用(yong)蒸館水(shui)沖洗(xi)三次倒(dao)置于(yu)(yu)干凈(jing)的(de)濾(lv)紙上晾干，然后存(cun)放于(yu)(yu)比(bi)色(se)皿盒中。如果(guo)比(bi)色(se)皿被有(you)機物污染(ran)(ran)宜用(yong)鹽酸-乙醇(1+2)混合液(ye)浸(jin)洗(xi)，也可(ke)用(yong)相應的(de)有(you)機溶劑(ji)(ji)浸(jin)泡(pao)洗(xi)滌(di)。如：油脂(zhi)污染(ran)(ran)可(ke)用(yong)石油醚(mi)浸(jin)洗(xi)，鉻天青顯色(se)劑(ji)(ji)污染(ran)(ran)可(ke)用(yong)硝酸(1+2)浸(jin)洗(xi)等，比(bi)色(se)血不可(ke)用(yong)堿液(ye)洗(xi)滌(di)，也不能用(yong)硬布(bu)毛(mao)刷(shua)刷(shua)洗(xi)。

含(han)有能腐(fu)蝕玻璃物質(zhi)的(de)溶(rong)液(ye)，如(ru)氫氟(fu)酸氟(fu)化物的(de)高濃度溶(rong)液(ye)，不(bu)可放入比色中。含(han)氟(fu)離子濃度低的(de)溶(rong)液(ye)也(ye)不(bu)宜在(zai)血中久置(zhi)。比色質(zhi)地(di)較脆(cui)石英(ying)皿(min)尤甚，使用時動(dong)作要輕，切勿摔碰。

五、比色皿的材質選(xuan)擇(ze)

比色皿選擇(ze)或使(shi)用不(bu)當(dang)，造成(cheng)無法測量或引(yin)起(qi)測量誤(wu)差(cha)的(de)現象在(zai)實驗中(zhong)經常出現，這一(yi)問(wen)題又很(hen)容易(yi)被實驗入員忽(hu)視(shi)。

紫(zi)外(wai)區(qu)的(de)定義(yi)為190-400nm，石英比(bi)色(se)皿(min)可用于190-900nm，玻(bo)璃比(bi)色(se)皿(min)用于360-900nm，紫(zi)外(wai)區(qu)的(de)一(yi)定要用石英比(bi)色(se)皿(min)，必須配置紫(zi)外(wai)/可見分光(guang)光(guang)度(du)計，否則低(di)波長段不能(neng)分析。對(dui)于一(yi)般的(de)非光(guang)學專業入員(yuan)，用眼睛是不能(neng)分開石英比(bi)色(se)皿(min)和玻(bo)璃比(bi)色(se)皿(min)的(de)。但(dan)兩(liang)者硬度(du)差別很(hen)大(da)(da)。石英比(bi)色(se)皿(min)比(bi)玻(bo)璃比(bi)色(se)皿(min)硬度(du)大(da)(da)（絕對(dui)值(zhi)）幾十倍，如果把兩(liang)個(ge)對(dui)磨(mo)，石英比(bi)色(se)皿(min)將很(hen)少被磨(mo)損，而玻(bo)璃比(bi)色(se)皿(min)磨(mo)損非常大(da)(da)。

由(you)于石(shi)英(ying)比(bi)(bi)色(se)皿的(de)透光范圍(wei)從0.12-4.5微(wei)米(mi)(120-450nm)，廣(guang)泛(fan)的(de)譜段(duan)范圍(wei)內沒有(you)任(ren)何吸(xi)收峰(feng)。而玻璃比(bi)(bi)色(se)皿只有(you)0.4—4微(wei)米(mi)（400-4000nm），且有(you)許多離子吸(xi)收峰(feng)。所以，石(shi)英(ying)比(bi)(bi)色(se)皿要比(bi)(bi)玻璃比(bi)(bi)色(se)皿優越的(de)多，化(hua)驗數據更(geng)準確、更(geng)可靠。